紫外分光光度計利用的是樣品對紫外光的吸收能力不同的原理,以測量某一特定波長(cháng)的紫外光波長(cháng)能量發(fā)生吸收的程度。樣品的吸收特性與其分子結構有關(guān),因此,紫外光譜可以用于分析樣品的化學(xué)結構以及其在制備和質(zhì)控過(guò)程中的純度和質(zhì)量。
紫外分光光度計主要由光源、單色器、待測樣品室、檢測器和計算機等五部分組成。
1、光源:它的光源通常采用一束高壓汞燈或者氘燈。
2、單色器:?jiǎn)紊鞯淖饔檬沁x擇所需的波長(cháng)范圍,以便用于測量。單色器通常由狹縫、光柵、反射鏡等部件組成,用于將白光分解成不同波長(cháng)的光,并按需選擇出目標波長(cháng)。
3、待測樣品室:待測樣品室是用于測量樣品吸收率的部分。它是一個(gè)光學(xué)容器,內部涂有黑色材料,以減小反射和散射。樣品通常放置在石英或者玻璃制成的管中,通過(guò)進(jìn)入室內的光線(xiàn)照射,在檢測器中收集出經(jīng)樣品所吸收的光線(xiàn)進(jìn)行測量。
4、檢測器:檢測器通常采用光電倍增管(PMT)或者光敏二極管(PSD)等器件來(lái)測量樣品的信號強度。
5、計算機:計算機用于輸入、處理和輸出數據。通常,計算機可以控制單色器、樣品室等部分的功能,并將檢測器中獲得的數據轉換成數字形式進(jìn)行分析和處理。
紫外分光光度計廣泛應用于化學(xué)、生物化學(xué)、藥學(xué)、食品、環(huán)境保護等領(lǐng)域,通常用于以下應用:
1、物質(zhì)定性和定量分析。
可以用于鑒定樣品中不同化學(xué)元素和官能團。例如,當不同樣品所吸收的波長(cháng)和吸收率差異存在時(shí),可以通過(guò)比對標準譜圖來(lái)確定物質(zhì)的種類(lèi)。對于已知物質(zhì),可以通過(guò)測量吸收率來(lái)計算其濃度。
2、合成過(guò)程監控。
可以用于監測化合物的合成過(guò)程。通過(guò)不斷檢測反應的UV吸光度,可以了解化合物的濃度變化情況。
3、純度檢測。
可以用來(lái)檢測樣品的純度。通過(guò)比對標準譜圖,可以確定樣品中其他雜質(zhì)的含量,并確保所測量的樣品不受到其他雜質(zhì)的干擾。
4、生物分子分析。
可以用于檢測蛋白質(zhì)、核酸和多糖等生物分子。通常是通過(guò)測量吸收光譜中的A280來(lái)確定生物分子的濃度,從而用于研究其結構和功能。
紫外分光光度計*的分析原理和檢測技術(shù),可以為科研和工業(yè)應用提供出色的分析手段,為人類(lèi)的健康與發(fā)展做出積極的貢獻。